Takara分享 | mRNA疫苗研究解决方案

“疫苗”无疑是新冠疫情时期的热词之一。第三代疫苗技术中的mRNA疫苗正在迎接属于它的时代。

将体外转录的mRNA注射到动物体内的研究早在90年代已有报道。注射到小鼠骨骼肌中的mRNA成功表达出蛋白质。随后持续不断地研究投入，为mRNA药理学带来了更多优化技术支撑。如今我们已经可以在体外合成更稳定、翻译效率更高的mRNA，具备了行之有效的递送技术。mRNA在疫苗研究以及其他治疗领域的应用将得到更加深入的探索与研究。

Takara mRNA疫苗研究解决方案为mRNA疫苗研究提供多种实验工具，应对体外合成、转染与表达检测等不同研究阶段需求。

Takara mRNA疫苗研究解决方案

mRNA体外合成

生产mRNA主要通过体外合成方式进行，体系中RNA聚合酶以DNA为模板体外转录得到mRNA。Takara提供多种mRNA合成工具酶及相关试剂。

货号

产品名称

规格

2540A

T7 RNA polymerase

5,000 U

2520A

Sp6 RNA polymerase

3,000 U

2181

poly(A) polymerase

20 U

2270A

Recombinant DNase I (RNase-free)

1,000 U

2313A

Recombinant RNase Inhibitor

5,000 U

※通过“Takara Bio中国官网”查看解决方案完整内容，了解限制性内切酶、核糖核苷酸等产品信息

mRNA转染

进行动物实验前，将mRNA转染细胞是初步验证所合成的mRNA是否有效的方法之一。Takara Xfect RNA转染试剂可以高效转染多种类型RNA至哺乳动物细胞，是包含转染所需全部试剂的完整系统。

货号

产品名称

规格

631450

Xfect RNA Transfection Reagent

1.2 ml

Xfect是可生物降解的纳米颗粒高分子聚合物转染试剂，可提供更低的细胞毒性和高转染效率，适用于广泛的细胞类型，保证高转染效率的同时保持了更高的细胞活性。

实验例

图1. HeLa细胞与间充质干细胞（MSCs）转染GFp mRNA。HeLa细胞（2.0×105）和间充质干细胞（6.0×104）使用1 μg GFp mRNA和5 μl Xfect RNA转染试剂进行处理。20小时后，通过落射荧光显微镜进行观察。HeLa细胞图像20倍放大，间充质干细胞图像40倍放大。

Western Blot蛋白表达检测

Western Blot分析仍然是目前实验室常用的检测分析方法之一，广泛应用于对目标蛋白质的检测与分析。转染细胞后的mRNA会获得怎样的表达情况，通过Western Blot检测可以获得一目了然的结果。

Takara提供丰富的Western Blot实验相关试剂，搭配详细的实验操作指南，提高Western Blot实验效率。

化学发光检出用HpR底物

货号

产品名称

规格

T7101A

Western BLoT Chemiluminescence HRp Substrate

250 ml

T7102A

Western BLoT Quant HRp Substrate

100 ml

抗原-抗体反应促进

货号

产品名称

规格

T7111A

Western BLoT Immuno Booster

250 ml each

T7115A

Western BLoT Immuno Booster pF

250 ml

HpR标识二抗替代

货号

产品名称

规格

T7122A

Western BLoT Rapid Detect v2.0

50 Rxns

封闭与洗脱

货号

产品名称

规格

T7131A

Western BLoT Blocking Buffer（Fish Gelatin）

1 L

T7132A

Western BLoT Blocking Buffer（protein Free）

500 ml

T7135A

Western BLoT Stripping Buffer

500 ml

电泳缓冲液方便装与蛋白质Marker

货号

产品名称

规格

T9101

Tris-Glycine-SDS Buffer (TG-SDS) powder, pH8.3

10 pouches（for 10 L）

T9102

Tris-Glycine Buffer (TG) powder, pH8.3

10 pouches（for 10 L）

3453A

CLEARLY protein Ladder (Unstained)

500 μl

3454A

CLEARLY Stained protein Ladder

500 μl

T9320A

TaKaRa CBB protein Safe Stain

1 L

《Western Blot实验操作指南》，欢迎下载阅读。

病毒RNA检测

动物实验是检验疫苗效果的重要一环。这其中少不了对不同实验组别动物体内病毒载量的检测。除了经典的组织病理学、免疫组化方法外，快速、灵敏的荧光定量pCR方法同样不可少。Takara提供高质量的病毒核酸检测相关产品，加速研究进程。

探针法一步RT-pCR试剂与病毒核酸提取

货号

产品名称

规格

RR064A

One Step primeScript™ RT-pCR Kit (perfect Real Time)

100 Rxns

RR600A

One Step primeScript™ III RT-qpCR Mix

200 Rxns

9766

TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0

50 Rxns

【文献案例】

-Huang, Qingrui, et al. “A Single-Dose mRNA Vaccine provides a Long-Term protection for HACE2 Transgenic Mice from SARS-CoV-2.” Nature Communications, vol. 12, no. 1, 2021, pp. 776–776.
-Zhang, Na Na, et al. “A Thermostable mRNA Vaccine Against COVID-19.” Cell, vol. 182, no. 5, 2020, pp. 1271–1283.

疫苗的研发是一场与病毒的赛跑。mRNA疫苗也随着不断开展的相关研究稳步向前，Takara疫苗研究方案为广大疫苗研究团队提供更多选择。点击下方专题，了解更多基因工程疫苗研究解决方案。

《重组腺病毒疫苗研究解决方案》

《重组蛋白疫苗研究解决方案》

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参考文献

ŸWolff, Jon A., et al. “Direct Gene Transfer into Mouse Muscle in Vivo.” Science, vol. 247, no. 4949, 1990, pp. 1465–1468.
Ÿpardi, Norbert, et al. “mRNA Vaccines — a New Era in Vaccinology.” Nature Reviews Drug Discovery, vol. 17, no. 4, 2018, pp. 261–279.

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