免疫CRISPR检测有助于早期诊断肾移植排斥反应

时间：2022-01-07 00:00:00 来源：网络整理

肾移植受者必须在余生中服用免疫抑制药物，以帮助他们的免疫系统免受外来器官的攻击。然而，肾排斥反应仍然可能发生，特别是在移植后的头几个月，这被称为急性排斥反应。症状包括血清肌酐水平升高，以及肾脏疼痛和发烧等症状。目前，唯一明确诊断的方法是通过活检，但这一程序只能在相对较晚的阶段发现问题。能够在早期阶段敏感而无创地诊断肾脏排斥反应将使医生能够更早地开始抗排斥药物治疗。研究人员此前发现，肾移植患者尿液中一种名为CXCL9的细胞因子蛋白的高水平是排斥反应的早期预警信号。但目前检测CXCL9(一种酶联免疫吸附试验，简称ELISA)的方法在尿中效果不太好，限制了其敏感性。因此，Jonathan Dordick和他的同事们想要开发一种更灵敏的技术来无创诊断尿中的急性肾排斥反应。

研究人员的检测方法基于CRISpR/Cas12a基因编辑技术。在CXCL9蛋白存在的情况下，CRISpR/Cas12a酶切割探针产生荧光信号。研究人员通过添加聚集了大量CRISpR/Cas12a分子的DNA条形码来增强荧光信号，并随后与识别CXCL9的抗体结合。重要的是，与其他基于crispr的检测方法不同，pCR扩增是不需要的，这使得该方法更容易适应可以在医生办公室甚至病人家里使用的设备。在对11名肾移植患者的尿样进行检测时，新系统准确测量了CXCL9水平，其值与ELISA非常相似。然而，研究人员说，由于免疫crispr系统的灵敏度大约是ELISA的7倍，它可能能够在非常早期的阶段检测肾移植排斥反应。

作者承认得到了美国国立卫生研究院的资助。

Journal Reference:

Inseon Lee, Seok-Joon Kwon, Mirco Sorci, peter S. Heeger, Jonathan S. Dordick. Highly Sensitive Immuno-CRISpR Assay for CXCL9 Detection. Analytical Chemistry, 2021; 93 (49): 16528 DOI: 10.1021/acs.analchem.1c03705

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